該如何保存胎牛血清看完本篇你就知道了

　　在細胞培養(yǎng)過程中，經(jīng)常加入5%-20%的胎牛血清，常使用的胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜，影響后續(xù)實驗的結(jié)果，我們在實驗中使用10%的胎牛血清培養(yǎng)293T細胞，效果非常好。
 

　　但是有些細胞也會使用5%的或者20%胎牛血清，要根據(jù)具體細胞選擇合適的胎牛血清濃度。
 

　　那么我們該如何保存胎牛血清呢?下面讓我們一起來了解一下吧。
 

　　1、需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。切勿將血清在37℃放置太久，否則血清會變得渾濁，同時血清中的有效成分會被破壞，而影響血清質(zhì)量。如果一次無法用完一瓶，可將40～45ml分裝于無菌50ml離心管中。
 

　　由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，必須預(yù)留一定體積空間，否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
 

　　2、一般廠商提供的血清為無菌，無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾，切勿直接過濾血清。
 

　　3、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫，待全部溶解后再分裝，一般以50ml無菌離心管可分裝40～45ml。
 

　　在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。
 

　　切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍，這樣因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
 

　　4、熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分滅活.除非必須，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質(zhì)量。
 

　　補體參與反應(yīng)有:細胞毒作用，平滑肌細胞收縮，肥大細胞和血小板釋放組胺，增強吞噬作用，促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化。
 

　　5、血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成，這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm，5分鐘去除，也可不用處理。顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清，沉淀物的形成會顯著增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點"，常誤認為血清受污染。一般情況下，此小黑點不會影響細胞生長，但如果懷疑血清質(zhì)量，則應(yīng)立即停止使用，更換另一批號的血清。